موضوع آزمایش :

          در این آزمایش هم مقدار هموگلوبین A₂ که از طریق کروماتوگرافی ستونی حاصل شده و هم مقدار هموگلوبین توتال به وسیله ی دستگاه اسپکتوفتومتراندازه گیری می شود و از طریق قرار گیری داده ها در فرمول مناسب در صد هموگلوبین A₂ به دست می آید .

هدف از انجام آزمایش :

        از انجایی که در بیماری های مربوط به هموگلوبین ها از قبیل انواع تالاسمی ها مقدار انواع مختلف هموگلوبین ها ی خون تغییر می یابد این آزمایش برای تشخیص بیماری هایی مانند تالاسمی ها به خصوص β - تالاسمی مینور بسیار حائز اهمیت است زیرا در این بیماری ، سنتز زنجیره ی β کاهش یافته و مقدار هموگلوبین A₂ ( α₂δ₂ ) و یاهموگلوبین F ( α₂γ₂ ) افزایش می یابد .

مقدمه :

    در علم بیوشیمی روش های مختلفی برای جداسازی مواد وجود دارد که شامل موارد زیر است :

·       سانتریفیوژ که بر پایه ی نیروی گریز از مرکز کار می کند و عمدتا برای لیپوپروتئین ها کاربرد دارد .

·       الکتروفورز که مکانیزم آن اساس حرکت مولکول های باردار در میدان الکتریکی است بدین ترتیب که مولکول های باردار به سمت قطب با بار مخالف ( ناهم نام ) حرکت کرده و از هم جدا می شوند .

·       کروماتوگرافی که شاید بیشترین سهم را در جداسازی مولکول ها داشته باشد که اولین بار برای جداسازی رنگدانه های گیاهی استفاده شد ؛ البته در این ازمایش از کروماتوگرافی ستونی استفاده می شود این روش خود شامل انواع گوناگونی است که همه ی ان ها در عین داشتن یک مکانیزم کلی تفاوت هایی نیز دارند که در ادامه به اجمال به شرح این تفاوت ها می پردازیم : 

میل ترکیبی که یک روش بسیار اختصاصی است چرا که یک آنتی بادی بر علیه آنتی ژنی که باید جدا شود در نظر گرفته می شود . 

ژل فیلتراسیون که در ان مولکول های مختلف بر اساس سایزشان از هم جدا می شوند که اصطلاحا به ان الک مولکولی نیز گفته می شود

.ü   HPLC ( high pressure liquid cromathography )که فرقش با بقیه در این است که پمپ هایی دارد که با فشار بالایی که بر ستون اعمال می کند باعث می شود که زودتر شسته شود ؛

در این روش کل آزمایش می تواند تنها در مدت 20 دقیقه انجام گیرد .   تعویض یون که در این ازمایش نیز مورد استفاده قرار می گیرد و برای جدا سازی مولکول های باردار به خصوص پروتئین ها یسیار کاربرد دارد .

تئوری آزمایش :